مقایسه تیترآنتی بادی تولید شده بر علیه پروتئین¬های نوترکیب BLF1 و BLF1-STxB در رت¬های آزمایشگاهی

مقدمه: باکتری بورخولدریا¬سودومالئی عامل بیماری میلوئیدوزیس و باکتری شیگلا¬دیسانتری شایع¬ترین عامل اسهال است و تاکنون هیچ واکسن موثری علیه این دو باکتری تولید نشده است. پروتئین BLF1 باکتری بورخولدریا سودومالئی نقش مهمی در ایجاد بیماری¬زایی و عفونت دارد. STxB شیگلا¬دیسانتری یکی از فاکتورهای مهم در بیماری¬زایی است و همچنین دارای نقش یاوری و حاملی است. ترکیب پروتئین BLF1 با STxB می¬تواند کاندیدای مناسبی برای واکسن باشد. در این مطالعه تیتر آنتی¬بادی پروتئین¬های BLF1-STxB وBLF1 در رت با یکدیگر مقایسه شد. مواد و روش: در این مطالعه تجربی وکتورهای pET28a(+)-blf1-stxB و pET28a(+)-blf1 به باکتری BL21(DE3) E. coli تراریخت و توسط PCR تایید شدند. بيان ژن¬های blf1-stxB و blf1 تحت القاي Isopropyl-β-D-thiogalactoside انجام و بعد از تخلیص پروتئین با استفاده از ستون کروماتوگرافی تمایلی، پروتئین¬های حاصل در چهار نوبت به رت تزریق شد. آنتی بادی پلی کلونال تولید شده در سرم رت¬ها اندازه گیری شد. یافته¬های پژوهش: پروتئین¬های نوترکیب تولید شده به وسیله SDS-PAGE و لکه¬گذاری وسترن مورد تایید قرار گرفتند. نتایج الایزا نشان داد که آنتی¬بادی علیه آنتی ژن BLF1 تولید شده و با ترکیب STxB با BLF1 میزان تیترآنتی بادی نسبت به تیترآنتی بادی علیه آنتی ژن BLF1 افزایش یافته است. بحث و نتیجه گیری: پروتئین BLF1-STxB تیترآنتی بادی بیشتری نسبت به BLF1 داشت. به علت شباهت ساختاری زیرواحد STxB با همتای آن در باکتری اشرشیاکلی می¬تواند کاندیدای واکسن علیه بورخولدریا سودومالئی، شیگلا دیسانتری، باکتری اشرشیا کلی انتروهموراژیک (EHEC) و اشرشیا انترو توکسینوژنیک (ETEC) باشد.

بورخولدریا سودومالئی، شیگلا دیسانتری، میلوئیدوزیس، BLF1، STxB