بررسی تاثیر عصاره هیدروالکلی کلم بروکلی و نانو ساختار چهارچوب فلزی آلی شماره 5 (MOF-5) بر بیان ژن آلکالین پروتئاز سوش های استاند
1395/11/20 16:35:34
نوع همکاری : مجری
کارفرما : مرکز تحقیقات سلولی و مولکولی
سال طرح : 1395
مشاهده سایر طرح های دکتر محمد ذوالعدل
مقدمه وهدف: پسودوموناس آئروژینوزا یکی از پاتوژن های اصلی بیمارستانی است. گیاه کلم بروکلی از تیره شب بویان بوده و عمده فعالیت ضدمیکروبی این گیاه اساساً به دلیل اجزای فنلی، سولفورافن و بنزیل اتیل ایزوتیوسیانات می باشد.MOF ها باعث تخریب غشای باکتری می شوند. محصول ژن آلکالین پروتئاز (AprD ) احتمالا در فرار باکتری از سیستم ایمنی میزبان نقش دارد. هدف از این مطالعه ارزیابی تاتیر عصاره کلم بروکلی، MOF-5 و نیز ترکیب هم زمان این دو باهم بر علیه بیان ژن آلکالین پروتئاز در سوش های بالینی و استاندارد پسودوموناس آئروژینوزا بوده تا در صورت موثر بودن بتوان از آن به عنوان مکمل درمانی در عفونت های ناشی از این باکتری استفاده کرد.
روش کار: در مطالعه حاضر ابتدا میزان غلظت MIC، MBC و ZOI عصاره هیدرو الکلی کلم بروکلی، MOF-5 و ترکیب این دو با هم، علیه سویه های مورد مطالعه پسودوموناس آئروژینوزا که واجد ژن AprD می باشند، بدست آمد. پس از مواجهه با میزان غلطت MIC تیمارهای ذکر شده، تغییرات بیان این ژن به روش RT-PCR Real Time مورد بررسی قرار گرفت.
یافته ها:: عصاره کلم بروکلی دارای MIC62.5 (µg/ml) برایPAO1 و سوش بالینی 3 و نیز MIC 31.25(µg/ml) برای سوشهای بالینی 1، 2 و4 می باشد. MOF-5 برای همه سوش ها دارای MIC 25 (µg/ml) می باشد. پس از انجام RT-PCR Real Time نتایج حاصل از Ct های بدست آمده با نرم افزار spss و آزمون one way ANOVA آنالیز شده و تفاوت معنی داری بین Ct Vales و Log10 Template molecules به میزان (P>0.05) مشاهده گردید.
نتیجه گیری: نتایج نشان دهنده کاهش بیان ژن AprD در شرایط in vitro به روش RT-PCR Real Time می باشد، ولی تاثیری بر بیان ژن Housekeeping DNA gyrase-A ندارد. با توجه به تاثیر مهاری عصاره کلم بروکلی، MOF-5 و اثر هم زمانی این دو علیه ژن آلکالین پروتئاز پسودوموناس آئروژینوزا احتمالا بتوان از این ها به عنوان مکمل درمانی علیه این باکتری و مهار ژن ویرولانس آن استفاده نمود.
کلمات کلیدی: PAO1، فلانوئید، MOF-5، عصاره کلم بروکلی، RT-PCR Real Time