بررسی سمیت سلولی و آپوپتوز ناشی از فراکسیون های عصاره هگزانی سیاه دانه در رده ی سلولی سرطانی تخمدان انسانA2780
1396/08/13 13:12:11
نوع همکاری : مجری
کارفرما : دانشگاه علوم پزشکی کرمانشاه
سال طرح : 1394
مشاهده سایر طرح های یلدا شکوهی نیا
سابقه و هدف:
سیاه دانه گیاهی است علفی و گل دار، با نام علمی Nigella Sativa، دانه های سیاه دانه طبق اطلاعات به دست آمده دارای ترکیباتی از جمله روغن ثابت، پروتئین ها، آلکالوئیدها، ساپونین و اسانس است که از دیرباز دارای خواص درمانی متعددی از جمله آنتی اکسیدانت و ضد التهاب می باشد. عصاره ی هگزانی سیاه دانه دارای سمیت سلولی قابل توجهی بر برخی از رده های سلولی سرطانی می باشد. در این مطالعه سمیت فراکسیون ها و ترکیبات خالص به دست آمده از عصاره N-هگزانی گیاه سیاه دانه بر روی رده ی سلولی A2780 مورد بررسی قرار گرفت.
هدف اصلی تعیین سمیت سلولی و آپوپتوز ناشی از فراکسیون های عصاره هگزانی سیاه دانه در رده ی سلولی سرطانی تخمدان انسانA2780 و جداسازی ترکیب شاخص.
مواد و روش ها:
دانه های سیاه دانه با هگزان به روش سوکسله عصاره گیری شد و سپس با متانول دو فاز گردید. فاز متانول سرد با روش کروماتوگرافی و مخلوط حلال هگزان و اتیل استات فراکسیون شد. سمیت سلولی فراکسیون های به دست آمده بر روی رده ی سلولی A2780 با استفاد از روش رنگ سنجی مورد بررسی قرار گرفت سپس فراکسیون فعال انتخاب گردید و ترکیبات آن با روش های ستون کروماتوگرافی و کروماتوگرافی مایع با عملکرد عالی (HPLC) به دست آمد و سمیت سلولی ترکیبات به دست آمده مجدداّ با روش MTT مورد بررسی قرار گرفت، سپس فعال ترین ترکیب شناسایی و میزان فعالیت آنزیم کاسپاز-3 و پتانسیل غشاء میتوکندری در سلول های سرطانی تخمدان انسانA2780 بعد از 48 ساعت تماس با ترکیب فعال اندازه گرفته شد.
یافته ها:
نتایج مرحله ی اول تحقیق نشان داد که فراکسیون 3A سمیت سلولی قابل توجهی در سلول های A2780 ایجاد می کند در مرحله ی بعد که فراکسیون 3A تخلیص شد نتایج حاصل از بررسی سمیت سلولی نشان داد هنگامی که سلول های A2780 در معرض ترکیب فعال قرار گرفتند، لینولئیک اسید توانست به میزان قابل توجهی رشد سلول ها را مهار نماید و باعث القاء آپوپتوز در سلول های سرطان تخمدان انسانی A2780 گردد.
بحث و نتیجه گیری:
پس از آنالیز داده ها و نتایج به دست آمده مشخص شد که لینولئیک اسید قادر به ایجاد سمیت سلولی و القای آپوپتوز از مسیر داخلی از طریق فعال سازی کاسپاز-3 در رده سلولی A2780می باشد , علاوه بر این مشاهدات لینولئیک اسید توانایی کاهش پتانسیل غشای میتوکندری در سلول های A2780 را دارد.
کلمات کلیدی: Nigella Sativa، لینولئیک اسید، سلول های A2780، آپوپتوز