شناسایی گونه های کاندیدای جدا شده از بیماران مبتلا به واژینیت کاندیدایی مراجعه کننده به کلینیک زنان پلی کلینیک شهید مفتح یاسوج
1398/10/01 18:42:48
نوع همکاری : همکار
کارفرما : مرکز تحقیقات سلولی و مولکولی
سال طرح : 1397
مشاهده سایر طرح های محمد امین قطعی
مقدمه: ولوواژنیت کاندیدایی ( برفک واژن) عفونت شایع در بین خانم ها در سنین باروری می باشد. این بیماری دارای علائمی هم چون خارش، درد، التهاب، ترشحات چرکی و قرمزی می باشد.گونه های مختلف از مخمر های جنس کاندیدا عامل بیماری می باشند ولی شایع ترین گونه¬ی مسبب بیماری کاندیدا آلبیکنس است و میزان بروز سایر گونه های غیر آلبیکنس که معمولا دارای مقاومت نسبت به آزول ها هستند در مطالعات و بررسی های اخیر در حال افزایش می باشد. کاندیدا فلور نرمال واژن می باشد که عوامل زمینه ساز مثل دیابت، مصرف قرص های ضد بارداری خوراکی ، مصرف طولانی مدت آنتی بیوتیک های وسیع الطیف و درمان با استروئیدها باعث ایجاد بیماری در خانم های مستعد می شود. هدف اصلی این مطالعه جداسازی و شناسایی مولکولی گونه های کاندیدای مسبب بیماری در مبتلایان به ولوواژنیت کاندیدایی در شهر یاسوج با روش PCR-RFLP از ناحیه ژنی ITS1-5.8S-ITS2 DNA ریبوزومی می باشد.
مواد و روش کار: از 310 بیمار مراجعه کننده به کلینیک زنان و زایمان شهید مفتح شهر یاسوج و دارای علائم ابتلا به ولوواژنیت کاندیدایی با سواپ استریل مرطوب از دیواره واژن توسط متخصص زنان و زایمان و کارشناس مامایی نمونه برداری انجام شد. سواپ های نمونه برداری شده به لوله های حاوی محیط سابورو دکستروز آگار و کلرامفنیکل تلقیح شدند و بعد از انتقال به آزمایشگاه در شرایط 35 درجه سانتی گراد درون انکوباتور نگهداری شدند. کلنی نمونه های کشت مثبت از نظر وجود مخمر مورد بررسی ماکروسپی و میکروسکوپی قرار گرفتند.DNA نمونه های کشت مثبت با روش فنل کلروفورم گلاس بید استخراج شدند و ناحیه ژنی ITS1-5.8S-ITS2 DNAریبوزومی با استفاده پرایمرهای یونیورسال ITS 1 و ITS 4 و واکنش PCR تقویت گردید و محصول واکنش PCR با استفاده از آنزیم MspI نوع Fast digest مورد تجریه و بعد از الکتروفورز مورد شناسایی قرار گرفتند. برای شناسایی مبتلایان به عفونت همزمان از محیط کاندیدا کروم آگار استفاده گردید.
نتایج: کشت 160(% 6/51 ) بیمار در مجموع مثبت شدند. دامنه سنی، زنان کمتر از 20 سال تا زنان بیش از 50 سال بود و بیشترین افراد مورد بررسی در رده سنی 40-30 سال (3/54 %) قرار داشتند. بیماران مورد بررسی 3/97% بیماران هیچ بیماری زمینه ای نداشتند درحالی که به ترتیب دیابت، رماتیسم و سرطان سینه بیشترین موارد بوده اند. 15% بیمارانی که واجد کشت مثبت بودند قرص های ضد بارداری مصرف می کردند . از نظر علائم بالینی بیماران این بررسی دارای علائم خارش، التهاب، مقاربت دردناک، سوزش، ترشح و درد بوده اند که در این میان خارش و ترشح بیشترین فراوانی را داشته اند. در بین ایزوله های جداشده کاندیدا آلبیکنس شایع ترین گونه عامل بیماری 139 مورد (%8/86)، کاندیدا گلابراتا %77/3 ، کاندیدا کروزه ای % 3 ، کاندیدا کفایر یک مورد % 65/. و 8 بیمار دارای عفونت همزمان با دو گونه مختلف کاندیدا ( عفونت همزمان کاندیدا آلبیکنس و کاندیدا گلابراتا 6 مورد ( %77/3 ) و کاندیدا آلبیکنس و کاندیدا کروزه ای 2 مورد ( %3/1) ) بودند.
بحث : در شهر یاسوج ولوواژنیت کاندیدایی در بین خانم های مراجعه کننده بسیار شایع می باشد و شایع ترین گونه مسبب بیماری در شهر یاسوج کاندیدا آلبیکنس می باشد. هم چنین گونه های غیر آلبیکنس و مقاوم به آزول ها در حال افزایش می باشند. و گونه های غیر آلبیکنس بیشتر از بیماران مبتلا به عفونت همزمان با دو گونه جدا می شوند. درمان مناسب ولوواژنیت کاندیدایی نیازمند شناسایی گونی¬ی کاندیدای مسبب عفونت و انتخاب درمان مطلوب می باشد.