بررسی الگوی توزیع ژنوتیپی جفت ایزوله های استافیلوکوکوس ارئوس جدا شده از ادنوئید و لوزه کودکان مبتلا به هایپرتروفی ادنوئید به رو
1398/10/16 18:01:48
نوع همکاری : همکار
کارفرما : دانشکده پزشکی
سال طرح : 1398
مشاهده سایر طرح های محمد امین قطعی
مقدمه:
اسـتافيلوكوكوس اورئـوس از مهـم تـرين عوامـل عفونتهاي بيمارستاني واكتسابي از جامعه ميباشد. استافیلوکوکوس اورئوس می تواند در سطوح مختلف بدن انسان از جمله پوست و غشای مخاطی و نیز سطوح تجهیزات پزشکی از جمله کاتتر ،ایمپلنت و وسایل درون رگی کلونیزه شود.
بررسي ژنوتيپي سويه هاي استافيلوكوكوس اورئوس به دليل نقشي كه در تمايز ايزوله ها دارد ميتواند كاربرد به سـزايي داشـته باشـد. تایپینگ بر اساس ژن spa یکی از ايــن عوامــل متمــايز كننــده اســت،که مشخص کند که اگر ایزوله هائی از نظر اپیدمیولوژیکی وابسته هستند آیا از نظر ژنتیکی به هم مربوط می باشند. اثبات ارتباطات کلون های یک پاتوژن به ما این امکان را می دهد که منبع آلودگی (انسان یا محیط) را پیدا کرده ، سویه های عفونی از سویه های غیر عفونی را متمایز نموده و در نهایت عود را از عفونت مجدد تفکیک نمائیم.هدف این مطالعه تعیین و مقایسه الگوی ژنوتیپی استافیلوکوکوس ارئوس های جدا شده از آدنوئید و لوزه کودکان مبتلا به هایپرتروفی آدنوئید با روش Spa typing می باشد.
مواد و روش ها:
نمونه گیری از بیماران قبلا در طرح دیگری انجام شده و در این مطالعه جفت باکتریهای استافیلوکوکوس ارئوس جدا شده از لوزه و آدنوئید بیماران مورد مطالعه قرار میگیرند.این مطالعه برروی 80 جفت ایزوله استافیلوکوکوس اورئوس انجام خواهد شد. به منظور تایپینگ به روش spa typing ، از پرايمرهاي زير استفاده میشود. Spaf; 5′-TAA AGA CGA TCC TTC GGT GAG C Spa R; 5′-CAG CAG TAG TGC CGT TTG CT-3′. پس از انجام PCR ژن spa ، محصولاتPCR به صورت دو رشته اي سكانس میشوند. . تواليهاي سكانس شده توسط نرم افزار Chromas آناليز میشود . سپس ناحيه متغير ژن در نرم افزار word مشخص میشود . توالي هاي تكراري ( معمولا24تايي) ناحيه متغير ژن نيز با كمك نرم افزارword مشخص میشود. در نهايت نوع و ترتيب توالي هاي تكراري در نتيجه مقايسه آنها با تواليهاي موجود در repeats database server spa (www.spaserver.redom.de) پيدا شده و spa تايپ هر جدايه مشخص میگردد.
یافته ها:
پس از انجام واکنش PCR جهت بررسی ژن SPA ، این ژن در 60 جفت ایزوله مشاهده گردید و در 20جفت ایزوله مشاهده نگردید و این 20جفت ایزوله از مطالعه حذف شده اند.در واقع این مطالعه بر روی 60 جفت ایزوله استافیلوکوکوس اورئوس جداشده از آدنوئید و لوزه انجام شد.تمام ایزوله ها با روش spa-typing تيپ بندي شدند و4 الگوی مختلف حاصل شد. نوع و الگوی Spa type ها در نمونه های استافیلوکوک اورئوس جدا شده از آدنوئید و لوزه شامل t701 و t081 و t2419 و t4870 بوده اند.
غالبترین تیپ های شناسایی شده در نمونه های استافیلوکوکوس اورئوس جدا شده از آدنوئید مربوط به تایپ های T081 با 67/71% و T701 با 67/11% بود.تایپ های T2419و T4870 به طور مشابه در 5 ایزوله جدا شده از آدنوئید یافت شده اند.
غالبترین تیپ های شناسایی شده در نمونه های استافیلوکوکوس اورئوس جدا شده ازلوزه مربوط به تایپ های T081 با65% و T701 با 20% بود.تایپ های T4870وT2419 هم به ترتیب فقط در 5 و 4 ایزوله یافت شده اند
ﻧﺘﻴﺠﻪ ﮔﻴﺮﻱ:
با مقایسه نوع و الگوی SPAتایپ در نمونه های جداشده از لوزه و آدنوئید، هم در ایزوله های استافیلوکوکوس اورئوس جداشده از آدنوئید و هم در ایزوله های جدا شده از آدنوئید تایپ T081 شایع ترین بود و تایپ T2419 به میزان کمتری یافت شد. 47 جفت ایزوله استافیلوکوکوس اورئوس جدا شده در تایپ های T701، T081،T2419، T4870 به هم شبیه بوده اند. 13 جفت ایزوله استافیلوکوکوس اورئوس (67/21%)جدا شده از لوزه وآدنوئید با هم متفاوت بوده اند و شباهتی با هم نداشتند. باتوجه به این شباهت ژنوتیپی بین ایزوله های استافیلوکوکوس اورئوس جدا شده از آدنوئید و لوزه کودکان مبتلا به هایپرتروفی آدنوئید، میتوان گفت ایزوله های شبیه به هم از یک منبع هستند.که می توان از این نتایج جهت اتخاذ تدابیر درمانی مناسب استفاده کرد.