طراحی آپتا حسگر ایمونوگلوبولین E بر پایه تثبیت آپتامر و متیلن بلو بر روی الکترود اصلاح شده با نانو کامپوزیت نانو لوله های چند دیواره کربن و مایع های یونی و چیتوسان

آپتامرها توالی¬های الیگونوکلئوتیدی DNA یا RNA سنتز¬شده¬ای هستند که در اشکال سه¬بعدی تا¬خورده¬اند و بصورت اختصاصی و با قابلیت بالا با مولکول¬های هدف برهمکنش می¬دهند. آپتامرها با استفاده از فرایند in vitro که SELEX (فرایند تكامل سيستماتيك ليگاندها توسط غني سازي نمايی) نامیده می¬شود، بدست می¬آید. این فرایند، آپتامر ویژه یک مولکول هدف را انتخاب می¬کند. در سال¬های اخیر آپتامرها به علت قابلیت بالا و عملکرد اختصاصی و پایداری¬شان به عنوان معرف¬های تشخیصی ایده¬آل و جایگزین آنتی¬بادی در توسعه نانوحسگرهای زیست¬تشخیصی بکار می¬رود. یکی از چالش¬های به¬کاربردن آپتامرها برای اندازه¬گیری مولکول¬های کوچک، قابلیت پایین آپتامر در برهمکنش با مولکول¬های بزرگ می¬باشد. ایمونوگلبولین E یکی از انواع آنتی¬بادی¬های سیستم ایمنی بدن انسان می-باشد، که با نسبت بسیار پایین در خون وجود دارد که بطو اساسی در پاسخ به واکنش¬های ¬آنی از نوع حساسیت شدید ایجاد می¬شود که منجر به بیماری¬های آلرژی مثل آسم و تب یونچه می¬شود. در این کار با استفاده از یک روش ساده و تکرارپذیر و بدون برچسب، به مطالعه برهمکنش آپتامر و مولکول کوچک پرداخته شد. متیلن¬بلو بعنوان شناساگر الکتروشیمیایی عمل می¬کند. مولکول آمینو¬آپتامر به روی الکترود کربن شیشه‌ای که با نانوکامپوزیت" مایع یونی، نانولوله¬های چند دیواره¬ای کربن و چیتوسان" اصلاح شده است، تثبیت می¬شود. برهمکنش کووالانسی آمین¬های آپتامر با آمین¬های چیتوسان با استفاده از گلوتارآلدهید بعنوان عامل متصل دهنده انجام شده است و از متیلن¬بلو به عنوان پروب الکتروفعال استفاده شده است. با استفاده از این سیستم، اندازه¬گیری کمی IgE، برحسب پاسخ های ولتامتری دیفرانسیل پالس متیلن-بلوهایی که به بازهای گوانین آپتامر متصل شده است، قبل و بعد از اضافه کردن IgE با حساسیت بسیار بالا انجام گرفت. جریان پیک MB بصورت خطی با افزایش غلظت IgE در محدوده nM 30-0.5، با حد¬تشخیص pM 37 کاهش می¬یابد. همچنین برای بررسی گزینش¬پذیری این زیست¬حسگر الکترشیمیایی، از آلبومین سرم گاوی (BSA) و لیزوزیم که از خانواده اسیدهای نوکلئیک بوده و از لحاظ ساختاری شباهت زیادی را با IgE دارد، بکار¬گرفته شد و در نهایت این آپتاحسگر برای آنالیز IgE موجود در سرم خون مورد استفاده قرار گرفت. صحتداده¬های بدست آمده در نمونه¬های موجود در خون با روش استاندارد ELSA مقایسه شده است و نتایج بسیار نزدیکی بدست آمد.