بررسی فرم تحت بالینی گامبورو به روش مولکولی PCR در مرغداریهای گوشتی شهرستان اراک

چکیده بیماری عفونی بورس یا گامبورو، بیماری بسیار مسری ویروسی رایج در مزارع مرغ گوشتی در سراسر جهان است که باعث کاهش و نقصان ایمنی در طیور جوان می گردد و علیرغم توسعه واکنش های جدید و بهبود روش های تشخیص، همچنان موجب بروز خسارات اقتصادی فراوانی به صنعت طیور دنیا میگردد. در این مطالعه تشخیص ویروس در نمونه های تحت بالینی با استفاده از آزمایش RT-PCR انجام گرفت.در این روش جوجه های 9 تا 10 روزه و به نسبت 1 در 1000 از 50 مرغداری گوشتی در شهرستان اراک در فاصله زمانی یکسان نمونه بر روی نمونه برداری شده، سه عضو بورس، طحال و کلیه از نمونه ها جدا شد. وزن بورس و وزن جوجه برای محاسبه اندیس بورس اندازه گیری شد و سپس به صورت دستجات ده تایی Bulk (بالک) دسته بندی شدند. RNA نمونه ها استخراج شد و بخاطر اطمینان از عدم آلودگی پروتئینی،اسکتوفتومتری به دو روش دستی و کامپیوتری روی نمونه ها صورت گرفت. به منظور تعیین مقدار نمونه ها برای انجام واکنش RT ضریب OD محاسبه و میزان نمونه بر اساس میکرولیتر محاسبه شد. واکنشRT جهت ساخت cDNA از RNA استخراج شده انجام گرفت و در نهایت آزمایش PCR بر روی آنها انجام گرفت. سپس تمامی نمونه ها بر روی ژل آگارز الکتروفورز شده و خوانده شدند. برای تأیید آزمایشات نمونه واکسن IBDL 1000 دزی لئوفیلیزه نیز همراه نمونه ها مورد آزمایش RT-PCR قرار گرفت. تست تأییدی بر روی ژل همراه با نمونه مثبت ویروس(VPX ) برای شناسایی موقعیت پروتئین VP2 نیز صورت گرفت. در نتایج هیچ نمونه مثبتی یافت نشد. در صورت شناخت این فرم و تعیین میزان آلودگی در منطقه بسیاری از سیاست ها مثل واکسیناسیون وحتی زمان آن ممکن است دستخوش تغییر شود. کلمات کلیدی: ویروس بورس عفونی طیور، اندیس بورس، VPX، اراک،RT-PCR