مقطع : کارشناسی ارشد
دانشگاه :
تاریخ دفاع :
اساتید راهنما : سيدجواد سيدطبايي
اساتید مشاور :
اساتید داور :
مشاهده سایر پایان نامه های سيد جواد سيدطبايي
سابقه و هدف:
توکسوپلاسما گوندی انگل تک یاخته درون سلولی است که می تواند طیف وسیعی از جانوران خون گرم را آلوده سازد. انسان به عنوان میزبان واسط از طریق خوردن اووسیست های عفونی، کیستهای نسجی و یا از طریق مادرزادي آلوده می شود. تقریباً یک سوم مردم در جهان آلوده به این انگل هستند. هدف از این مطالعه بررسی تولید آنتی بادی منوکلونال علیه پپتید سنتتیک از پروتئین SAG1 توکسوپلاسما گوندی بود.
روش بررسی:
در اين مطالعه از پپتید سننتیک پروتئین SAG1 کونژوگه شده با Keyhole Limpet Hemocyanin برای ایمن سازی موش BALB/c و از روش ELISA برای ارزیابی ایمن سازی موش ها استفاده شد. به منظور تولید سلول های هیبریدوما، طحال موش واکسینه شده با تیتر بالاتر آنتی بادی سرم در شرایط استریل برداشته شد و سپس در یک پلیت ۹۶ حفره به سلولهای میلومای موشی SP۲/۰ در محیط اتنخابی HAT فیوژ گردید. تشکیل کلون روزانه مورد بررسی قرار گرفت. حضور آنتی بادی علیه پپتید واکسینه شده با روش الیزا تعيين گرديد. آنتی بادی تولید شده از سوپرناتانت کلون توسط ستون کروماتوگرافی گرایشی که با اتصال پپتید به CNBr سفاروز 4B آماده شده بود تخلیص وتوسط SDS-PAGE سنجیده شد. واکنش آنتی بادی تخلیص شده با پپتید ایمنوژن با تست الیزا بررسی گردید.
یافته ها:
ارزیابی توانایی آنتی بادی در شناسایی پروتئین SAG1 در لیزات تهیه شده از توکسوپلاسما گوندی با روش وسترن بلات نشان داد که آنتی بادی تولید شده از خلوص مطلوبی برخوردار بوده و توانایی شناسایی پپتید ایمونوژن و پروتئین SAG1 را دارد.
بحث و نتیجه گیری:
با توجه به کارآمدی این آنتی بادی منوکلونال در شناخت آنتی ژن SAG1 توکسوپلاسما گوندی، این آنتی بادی میتواند به عنوان یک ابزار مناسب جهت استفاده درتست های تشخیصی، درمانی و امور تحقیقاتی به کار گرفته شود.