ایجاد سازواره ژنی برای همسانه سازی ژن فیتاز باکتری باسیلوس سوبتیلیس درباکتری E.coli

فیتاز آنزیمی است که اسید فایتیک را هیدرولیز و فسفر معدنی تولید می کند. یکی از منابع بیان کننده آنزیم فیتاز، باکتري ها هستند که در این میان جنس باسیلوس مهم ترین باکتري تولیدکننده فیتاز قلیایی مقاوم به حرارت می باشد. فرم اصلی ذخیره سازی فسفر با منشا گیاهی در حیوانات است. این آنزیم را می توان به عنوان مکمل برای بهتر جذب شدن فسفر در حیوانات و کاهش آلودگی فسفر در فضولاتشان قرار داد. هدف از این مطالعه استخراج وکلون سازی ژن فیتاز باکتری باسیلوس سوبتیلیس در باکتری اشرشیا کلی بود. ژن فیتاز خارج سلولی باکتري باسیلوس سابتیلیس با استفاده از آغازگرهاي اختصاصی حاوي سایت هاي برشی جداسازي می شود. به منظور انجام توالی یابی و بررسی خصوصیات، ژن تکثیر شده phyCبه وکتور انتقال داده می شود و پس از آن به اشرشیا کلی انتقال داده شد. حضور ژن هدف در ناقل کلونینگ pGEM، با استفاده از روش PCRهمسانه‌سازی ژن 1171 جفت بازی فیتاز انجام شد و با هضم آنزیمی نهایی XbaI و XhoI تایید می شود. نتایج تحقیقات نشان داد که به خوبی می توان نسبت به کلونینگ ژن فیتاز در وکتور کلونینگ اقدام کرد. بر اساس نتایج به دست آمده پیشنهاد می شود که با تولید حیوانات و گیاهان تراریخته که داراي ژن فیتاز می باشند بر مشکل تامین فسفات مورد نیاز آنها از منابع فسفات آلی و به ویژه فیتاز غلبه شود.