Leishmania تک یاخته‌ی درون سلولی اجباری است و پشه‌ی خاکی به عنوان ناقل، با نیش زدن اشکال عفونی انگل را به میزبانان خود منتقل می‌کند. شناسایی آنتی‌ژن‌های کاندیدا برای واکسن از اهمیت ویژه‌ای برخوردار است. آنزیم مانوز 1 فسفات گوانیل ترانسفراز از جمله‌ی این آنتی‌ژن‌ها می‌باشد. روش ها: با استفاده از DNAاستخراج شده از Leishmania major (MRHO/IR/75/ER) توسط PCR، ژن کدکننده‌ی آنزیم مانوز 1 فسفات گوانیل ترانسفراز تکثیر و محصول PCR در پلاسمید pTZ57R کلون شد. سپس کلنی‌های به دست آمده با دو آنزیم محدود اثرBamHI وEcoRI مورد هضم قرار گرفت. قطعه‌ی خارج شده در پلاسمید pET32a به عنوان حامل بیان ژن، ساب کلون گردید. برای تأیید کلون pET32a_man از روش هضم آنزیمی استفاده و سپس قطعه‌ی مربوط تعیین توالی گردید. یافته ها: محصول PCR بر روی ژل آگاروز الکتروفورز شد. بعد از کلون کردن محصول PCR در پلاسمید pTZ57R و pET32a، هضم آنزیمی توسط آنزیم‌های محدود اثر نشان داد که ژن کدکننده‌ی این آنزیم در هر دو پلاسمید به طور صحیح کلون شده است. نتیجه گیری: توالی ژن آنزیم تکثیر شده با توالی آن در بانک ژن 92% شباهت را نشان داد که این نتایج تأییدی بر حفاظت شده بودن (Conserved) توالی ژن این آنزیم در میان ژن‌های مختلف Leishmania major (MRHO/IR/75/ER) است.
کلید واژگان :Leishmani major، آنزیم مانوز 1- فسفات گوانیل ترانسفراز، کلونینگ
ارزش ریالی : 600000 ریال
با پرداخت الکترونیک