تمايز ايزوله هاي كريپتوسپوريديوم جداشده از انسان و گاو با استفاده از قطعه 1055 bp ژن 18S rRNA

سابقه و هدف: با توجه به شيوع انواع کريپتوسپوريديوم در اشخاص با سيستم ايمنی کارآمد و ناکارآمد و ضرورت تمايز گونه‌های انسانی و حيوانی و اهميت استفاده از ژن 18srRNA اين پژوهش در شهر تهران انجام گرفت. هدف اين تحقيق تمايز ايزوله‌های کريپتوسپوريديوم جدا شده از انسان و گاو با استفاده از قطعه 1055 جفت نوکلئوتيد ژن 18S rRNA بود. روش بررسی: تعداد 1020 نمونه مدفوع انسانی و940 نمونه مدفوع گاوی با استفاده از روش اسيد فست اصلاح شده مورد بررسی قرار گرفت و نمونه‌های مثبت تعيين شد. DNA نمونه‌های مثبت توسط کيت Qia Amp استخراج گرديد و بعد با استفاده از 4 پرايمر طراحی شده يک قطعه DNA به تعداد 1055 جفت نوکلئوتيد از ژن 18s rRNA باروش Nested- PCRتکثير شد و محصول PCR دوم برای تعيين گونه کريپتوسپوريديوم توسط آنزيمهای Ssp1 و Vsp1 هضم شد و روی ژل آگاروز 5/2% و رنگ‌آميزی اتيديوم برومايد الکتروفورز گرديد. يافته‌ها: در مطالعه فوق، تعداد موارد مثبت انسانی 12 و موارد مثبت گاوی 23 نمونه تعيين شد. تمامی نمونه‌های مثبت با روش مولکولی مورد بررسی قرار گرفتند و نتايج روش اول تأييد شد. همه نمونه‌های گاوی و 10 نمونه انسانی دارای حرکت الکتروفورتيک مشابه بر روی ژل آگاروز 5/2% بود که تائيدکننده گونه کريپتوسپوريديوم پاروم گاوی بود ولی 2 نمونه انسانی دارای باندهای متفاوت بودند که تعيين سکانس شد و تمايزشان با نمونه‌های گاوی و انسانی بدست آمده تأئيد گرديد. نتيجه‌گيری: با وجودی که محققين در ساير کشورها کريپتوسپوريديوم پارووم را بعنوان عامل اصلی کريپتوسپوريديوزيس انسانی معرفی کرده‌اند، آلودگی به نوع هومينيس را نيز حائز اهميت دانسته‌اند. در اين تحقيق نيز آلودگی انسان به دو نوع کريپتوسپوريديوم پاروم و هومينيس مشاهده شد که گونه غالب آن کريپتوسپوريديوم پاروم بود.

کريپتوسپوريديوم پاروم، کريپتوسپوريديوم هومينيس، ژن 18S rRNA.،