چکیده :

هدف: تريكوسترنژيليازيس بيماري مشترك بين انسان و دام مي باشد و از نقطه نظر بهداشتي و اقتصادي حايز اهميت است. تعيين هويت دقيق گونه ها بعنوان اولين قدم در طراحي استراتژيهاي پيشگيري، كنترل و درمان همچنين مطالعات اپيدميولوژي بيماريهاي انگلي مطرح مي باشد. هدف از انجام اين تحقيق تعيين گونه نماتودهاي تريكوسترنژيلوس با تكنيك PCR-RFLP در اصفهان بوده است. روشها: نوع مطالعه توصيفي- تحليلي مي باشد. اين مطالعه از تاريخ بهمن 1381 با جمع آوري نمونه ها از دستگاه گوارش 56 راس گوسفند و 53 راس بز كشتار شده در كشتارگاههاي شهر اصفهان و خوراسگان آغاز گرديد. شناسايي نماتودهاي جدا شده براساس شاخصهاي ريخت شناسي و كليدهاي تشخيصي و رنگ آميزي كيسه جفت گيري با آزوكارمن انجام شد. در مطالعه ژنوتيپي DNA ژنومي كرمها استخراج شد و با پرايمر اختصاصي قطعه rDNA-ITS2 واكنش PCR انجام گرفت و محصول PCR هرايزوله توسط آنزيمهاي محدود كننده Dral، Hinfl و Rsal هضم گرديد و سپس روي ژل آگارز الكتروفورز شد و از آنها عكس تهيه شد. يافته ها: براساس خصوصيات بارز ريخت شناسي چهار گونه تريكوسترنژيلوسT.probulurus, T.colubriformis, T.vitrinus, T.axei شناسايي شدند. اندازه محصول PCR هرچهار گونه يكسان و حدود 330 نوكلئوتيد بود، الگوي PCR-RFLP گونه ها با يكديگر متفاوت بود. از هضم محصول PCR آنها با آنزيم RsaI دو قطعه حدود 138 و 190 نوكلئوتيدي مشاهده شد. محصول PCR تريكوسترنژيلوس پروبولوروس با آنزيم DraI هضم نشده اما سه گونه ديگر هضم شدند كه دو قطعه حدود 110 و 215 نوكلئوتيدي در T.axei وT.colubriformis رويت گرديد كه الگويي مشابه همديگر داشتند اما T.vitrinus واجد دو قطعه حدود 145 و 185 نوكلئوتيدي بود، از بين چهار گونه فوق تنها محصول T.colubriformis PCR با آنزيم Hinf هضم شد و دو قطعه حدود 90 و 238 نوكلئوتيدي روي ژل آگارز مشاهده شد. نتيجه گيري: در بررسي حاضر براساس شاخصهاي ريخت شناسي و الگوي ژنوتيپي تريكوسترنژيلوسها با روش RFLP - PCR چهارگونه تعيين هويت شدند. با اين كار الگويي جهت افتراق گونه هاي تريكوسترنژيلوس منطقه اصفهان با استفاده از آنزيمهاي محدود كننده DraI، HinfI و RsaI تعيين گرديد.

کلید واژگان :

‌تريكوسترنژيليوس،RsaI, HinfI, DraI, rDNA, ITS2, PCR, RFLP



ارزش ریالی : 600000 ریال
دریافت مقاله
با پرداخت الکترونیک