بررسي تغييرات پروتئينهاي پلاسماي مني گاوميش آذري در دو فصل گرم و سرد

گاوميش آذري از دام هاي بومي است كه بيش از 80 درصد از جمعيت كل گاوميش ايران را شامل مي شود ولي بعلت محدوديت جغرافيايي بسياري از ابعاد توليد مثلي اين حيوان ناشناخته مانده است. هدف از اين تحقيق ارزيابي پروتئين هاي پلاسماي مني گاوميش نر آذري و آزمايش ارتباط پروتئين هاي پلاسماي مني با معيار هاي كيفي در دو فصل گرم و سرد سال مي باشد. براي اين مطالعه 40 نمونه مني براي هر فصل از 10 عدد گاوميش نر هر كدام 4 بار بوسيله مهبل مصنوعي گاوي گرفته شد. قبل از الكتروفورز نمونه ها مشخصات مني (حركت، شكل، زنده بودن و غلظت) ثبت شد. نمونه هاي مني سانتريوفوژ گرديده و مايع رويي جدا گرديد و پروتئين كل پلاسماي مني به وسيله روش بيوره اندازه گيري با غلظت 10 SDS-PAGE حل شده و سپس در PBS گرديد. سپس با اتانول مخلوط گرديده و دوباره سانتريوفوژ گرديد و پس از رسوب با درصد مورد استفاده قرار گرفتند. 54 باند پروتئيني ( 8 باند مختلف) روي ژل ها تشخيص داده شد كه وزن ملكولي آنها با استفاده از تكنيك بين 14.4 تا 80.5 كيلو دالتون بود بيشتر باندهاي پروتئيني جدا شده زير 35 كيلودالتون وزن داشتند و بيشترين تعداد باند SDS-PAGE پروتئيني مربوط به باند 35.5 كيلو دالتون بود،اين پروتئين ممكن است همان فاكتور رشد شبيه به انسولين باشد، و باند پروتئيني 35.3 فقط در نمونه مني يك گاوميش پيدا شد. تعدادي از باندهاي پروتئيني ارتباط معناداري با مشخصات مني در فصل گرم وسرد داشتند. مثلا باند پروتئيني 14.4 كيلو دالتون افزايش 40 درصدي در پلاسماي مني جمع آوري شده در فصل سرد نسبت به فصل گرم داشت ودر بررسي ما اين افزايش با اين پروتئين در گاوهاي نر با قدرت (p≤ كاهش حركت پيشرونده و درصد زنده ماني اسپرم در فصل سرد سال رابطه معني دار داشت ( 0.05 انجماد بيشتر يافت مي شود و به غشا اسپرم متصل مي شود و محققين نقش منفي آنرا بر باروري گاو احتمالا با اثر بر مهاركننده متالوپروتئيناز بافتي مي دانند. از طرفي در اندازه گيري باندهاي پروتئين پلاسما افزايش 40 درصدي پروتئين 24.5 كيلو دالتون را در فصل گرم سال داشتيم كه و رابطه با درصد زنده (p≤ با افزايش عملكرد اسپرم در فصل گرم ارتباط معنادار داشت، رابطه با حركت پيشرونده در فصل گرم سال ( 0.008 معنادار گزارش گرديد. پروتئين 24.5 كيلو دالتون شايد پروستوگلندين دي سنتتاز باشد كه با باروري بيشتر گاو نر در (p≤ ماني اسپرم ( 0.01 ارتباط است. با توجه به مطالعه حاضر ميزان همبستگي و ارتباط بين مقادير پروتئين كل پلاسماي مني با درصد اسپرمهاي زنده در فصل گرم و مثبت گزارش گرديد. نتيجه اينكه تغيير كيفيت اسپرم هاي گرفته شده از مني r=0.435 ،p≤ و 0.01 r=0.849 ،p≤ سرد سال در حد 0.01 گاوميش آذري در دو فصل گرم و سرد سال مي تواند بعلت تغيير در پروتئين هاي پلاسماي مني خصوصا باندهاي 14.4 و 24.5 بوقوع بپيوندد.

پروتئين هاي پلاسماي مني، گاوميش آذري، فصل گرم، فصل سرد