هدف: كلونينگ ژن آنزيم گلوكوسربووزيداز در پلاسميد pUCBM21 و ايجاد يك موتاسيون در داخل قالب ژني در آن و ترادف يابي آنها. مواد و روشها: در اين پژوهش كه يك تحقيق توصيفي است، از طحال موش mRNA استخراج شد و cDNA ژن آنزيم Gba با استفاده از پرايمرهاي اختصاصي سنتز و به روش PCR تكثير شد. سپس ژن تكثير شده در پلاسميد pUCBM21 كلون شد. پس از آناليز آنزيمي پلاسميد نو تركيب توسط آنزيمهاي محدودگر، با استفاده از آنزيم MscI و حذف سكانسهايي از اگزونهاي مياني موتاسيون داخل قالب ژني ايجاد شد، سپس ژن اصلي و ژن موتان يافته ترادف يابي شد. يافته ها: cDNA ژن با bp1616 تكثير شد. با استفاده از پنج آنزيم محدودگر تكثير ژن، كلونينگ و موتاسيون ايجاد شده در آن تاييد شد. پس از بررسي ترادف اسيد آمينه ها، موتاسيون ايجاد شده در ژن تاييد شد. نتيجه گيري: از كلونينگ، ترادف يافي و ايجاد موتاسيون در ژن آنزيم گلوكوسربروزيداز براي انتقال و بيان آن در مطالعات آينده مي توان استفاده نمود.
کلید واژگان :آنزيم گلوكوسربروزيداز، كلونينگ، وكتور pUCBM21، موتاسيون
ارزش ریالی : 350000 ریال
با پرداخت الکترونیک