سابقه و هدف : پروتئازها یکی از مهم ترین آنزیم هاي کاربردي در بیوتکنولوژي و صنایع مختلف مانند صنایع چرم، صنایع غذایی، داروسازي، شوینده ها و غیره می باشند . میکروب ها به دلیل رشد سریع، سهولت کشت، دستکاري ژنتیکی در جهت تولید بهینه آنزیم، از منابع عمده تولید پروتئازها به شمار می روند . این مطالعه با هدف جداسازي سویه هاي سراشیا مارسیسنس از منابع طبیعی غرب مازندران و ارزیابی قابلیت تولید آنزیم پروتئاز انجام شده است. مواد و روش ها : این پژوهش به صورت مقطعی بر روي 150 نمونه جمع آوري شده از عمق 0 تا 10 سانتی متري خاك ها و آب هاي مناطق غرب مازندران انجام شد . به منظور جداسازي و شناسایی اولیه میکروارگانیسم هاي داراي فعالیت پروتئولیتیک از محیط کشت Skim milk و آزمون هاي یوشیمیایی استفاده شد . پس از استخراج DNA و با استفاده از پرایمر اختصاصی ژن 16S rDNA گونه سراشیا مارسیسنس شناسایی گردید . سپس بهینه سازي دمایی و زمانی بر روي سویه هاي برتر مولد آنزیم انجام شد. همچنین وزن مولکولی تقریبی آنزیم به وسیله رسوب دهی پروتئین و روشSDS-PAGE تعیین گردید. یافته ها: در مجموع از 2 سویه سراشیامارسیسنس جداسازي شده در این مطالعه، نمونه N به عنوان سویه جدید با نام سراشیا مارسیسنس سویه 424 در بانک جهانی ژن با شماره KC790390 به ثبت رسید . این دو سویه بیشترین مقدار تولید آنزیم را در دماي 37 درجه سانتیگراد و در مدت 24 ساعت نشان دادند . بیشترین تولید آنزیم مربوط به سراشیا مارسیسنس سویه 424 با فعالیت معادل U/ml 199/80 و وزن مولکولی 52 کیلو دالتون بود. نتیجه گیري : نتایج به دست آمده در این مطالعه نشان دهنده پتانسیل بالاي سراشیا مارسیسنس سویه 424 در تولید پروتئاز و سراشیوپپتیداز می باشد. بنابراین ارزیابی پتانسیل کاربردي این آنزیم ها در صنایع مختلف پیشنهاد می شود.
کلید واژگان :سراشیا مارسیسنس، 16S rDNA، سراشیوپپتیداز، فعالیت آنزیمی، SDS-PAGE
ارزش ریالی : 350000 ریال
با پرداخت الکترونیک