زمینه و هدف: فیتاز¬ها یک گروه از فسفاتاز¬ها هستند که قادر به هیدرولیز فیتیک اسید می باشند. فیتازها با تجزیه ی فیتات قادر به کاهش یا حذف اثرات مخرب فیتات هستند. فیتاز اسیدی و مقاوم دمایی همراه با تولید بالا و خالص و البته یک سیستم نسبتا ارزان دارای کاربرد در مقیاس وسیع می باشد. لذا در این مطالعه با تغییراتی در توالی آنزیم، تولید فیتاز نوترکیب با طول کمتر و میزان بیان بیشتر مورد بررسی قرار گرفت. روش بررسی: توالی ژن فیتاز از پایگاه NCBI گرفته شد. پس از مطالعات بیوانفورماتیکی و اعمال تغییرات مورد نظر به منظور افزایش بیان پروتئین، تکثیر ژن با استفاده از PCR انجام شد. برای بیان ژن فیتاز از سویه E.coli BL21 (DE3) استفاده شد. تخلیص پروتئین با کیت Ni-NTAانجام شد و نهایتا فعالیت آنزیم مورد ارزیابی قرار گرفت. یافته ها: فیتاز با موفقیت بیان و تخلیص گردید. سنجش فعالیت آنزیم نشان دهنده ی فعالیت مورد توجه آنزیم بود. نتیجه گیری: فیتاز نوترکیب تولید شده علی رغم حذف بخش هایی ار آنزیم دارای فعالیت بالا می باشد.
کلید واژگان :فیتات ، فیتاز، کلونینگ
ارزش ریالی : 600000 ریال
با پرداخت الکترونیک